HPLC测定逍遥丸中甘草苷、异甘草素和甘草酸的含量

目的建立测定逍遥丸中甘草苷、异甘草素和甘草酸含量的方法。方法色谱柱:Shim-packVP-ODS(150 mm×4.6 mm,5.0μm)。流动相:甲醇-0.5%冰醋酸梯度洗脱;流速1 mL.min 1;检测波长0～7 min为276 nm,7～18 min为370 nm,18 min以后为254 nm。结果甘草苷的线性范围是0.018 40～0.368 0μg(r=0.999 8,平均回收率为97.96%,RSD为0.60%);异甘草素的线性范围是0.015 2～0.304 0μg(r=0.999 9,平均回收率为97.17%,RSD为1.02%);甘草酸的线性范围是0.441 8～8.835 0μg(r=0.999 9,平均回收率为97.52%,RSD为1.06%)。结论所建立的方法简便可行、重复性好,可用于逍遥丸的质量控制。     

甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白功能和表达的影响

目的 研究甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-糖蛋白（P-gp）功能和表达的影响,探讨甘草解毒的作用机制。方法 采用流式细胞仪检测经甘草黄酮类成分处理后Caco-2细胞对罗丹明123摄取量的影响,以评价P-gp的外排功能;采用Western blotting法检测甘草黄酮类成分对Caco-2细胞P-gp表达的影响。结果 与对照组相比,甘草总黄酮5、10、50、100 μg/mL作用Caco-2细胞1 h后,使细胞内罗丹明123的荧光强度分别减少61.1%、56.3%、49.2%、45.4%;甘草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、芹糖基甘草苷、芹糖基异甘草苷在相同质量浓度,使细胞内罗丹明123的荧光强度减少了19.3%～37.9%。与对照组相比,甘草总黄酮10～400 μg/mL给药后72 h,使Caco-2细胞膜上P-gp的表达显著增加（P＜0.01）;甘草苷、异甘草苷、甘草素、芹糖基甘草苷5～400 μmol/L,异甘草素、芹糖基异甘草苷10～400 μmol/L对此也有显著作用（P＜0.01）。结论 甘草黄酮类成分增强Caco-2细胞P-gp的功能,上调P-gp的表达,促进细胞内有毒物质的外排,减少有毒物质在肠道的吸收,这可能是甘草配伍其他中药的解毒机制之一。     

HPLC-UV-MS法同时测定痹祺胶囊中7个有效成分

目的 建立高效液相色谱:紫外-串联质谱法同时测定痹祺胶囊(马钱子、川芎、片草、丹参、白术、三七、党参等)中7个有效成分的方法.方法 采用HPLC法,Zorbax-C18色谱柱(4.6 mm× 100 mm,1.8 μm);流动相乙腈-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;进样5μL; DAD波长切换模式;柱温40℃.Finnigan电喷雾离子阱多级质谱仪,正/负离子检测模式;ESI喷雾电压±4.5 kV;鞘气(N2)压力为276 kPa;辅助气(N2)体积流量为3.3 L/min;毛细管温度350℃;毛细管电压±19 v;扫描范围m/z100 ～ 850 amu.结果 士的宁、马钱子碱、甘草苷、丹酚酸B、甘草酸、隐丹参酮和丹参酮ⅡA在相应的质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.9996;平均加样回收率(n=6)在90.25％～99.11％之间,RSD均小于2.91％.结论 本方法简便快捷、精密度高、重复性好,适用于痹祺胶囊的质量控制.     

正交试验优选四逆汤机械煎煮工艺

目的:优化四逆汤机械煎煮工艺。方法:以苯甲酰新乌头原碱、甘草苷、甘草酸和6-姜酚的含量为考核指标,采用RP-HPLC法测定指标成分含量,通过单因素试验和正交设计考察加水量、浸泡时间、煎煮时间及煎煮次数等影响因素,优选四逆汤机械煎煮工艺。结果:四逆汤最佳机械煎煮工艺为浸泡时间60 min,煎煮时间60 min,加水量10倍,煎煮2次。结论:优化的煎煮工艺合理可行,为提高四逆汤剂质量与临床疗效提供实验基础。     

双波长-高效液相色谱法同时测定镇咳宁糖浆中盐酸麻黄碱、甘草苷、甘草酸的含量

目的建立同时测定镇咳宁糖浆中盐酸麻黄碱、甘草苷和甘草酸含量的方法。方法色谱柱:Shim-pack VP-ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-体积分数为0.1%磷酸溶液梯度洗脱;检测波长:205 nm(盐酸麻黄碱)、237 nm(甘草苷与甘草酸);流速:1.0 mL.min-1。结果盐酸麻黄碱、甘草苷、甘草酸质量浓度分别在6.222～414.8 mg.L-1、2.335～116.7 mg.L-1、12.45～415.0 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均为0.999 9,平均回收率分别为98.92%、103.0%和98.24%。结论本方法操作简便,结果可靠,可作为镇咳宁糖浆的质量控制方法。     

桔贝合剂HPLC特征图谱的建立和HPLC-ELSD同时测定6种成分含量

目的 建立桔贝合剂的HPLC特征图谱,并采用HPLC-ELSD同时测定其中6种成分的含量。方法 建立桔贝合剂HPLC特征图谱,色谱柱为Agilent ZORBAX-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min–1,柱温为30℃,检测波长为250 nm;含量测定采用HPLC-ELSD,色谱柱为WatersT3C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-1%乙酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL·min–1,柱温为30℃。结果建立了以黄芩苷为参照峰的HPLC特征图谱,确定了8个共有特征峰;苦杏仁苷、甘草苷、贝母素甲、贝母素乙、桔梗皂苷D和麦冬皂苷D在各自范围内线性关系良好(r≥0.999),平均回收率分别为99.1%,98.6%,100.9%,97.7%,98.9%和98.0%,RSD分别为0.4%,1.0%,1.1%,1.2%,0.7%,1.3%。结论 本研究建立的方法可对桔贝合剂进行定性鉴别和定量测定,能够有效评价与控制桔贝合剂质量。     

HPLC同时测定半夏糖浆中琥珀酸、橙皮苷、甘草苷3种成分的含量

目的 建立HPLC同时测定半夏糖浆中琥珀酸、橙皮苷、甘草苷3种成分的含量。方法 采用C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,以乙腈-0.2%磷酸溶液（18：82）为流动相,流速1.0 mL·min^-1,检测波长207 nm,柱温为常温。结果 3种待测成分分离度良好,阴性无干扰;3个成分线性范围分别为4.727~118.17 μg·mL^-1（r=0.999 9）,2.474~61.857 μg·mL^-1（r=0.999 6）,2.469~61.725 μg·mL^-1（r=0.999 9）;琥珀酸、橙皮苷、甘草苷平均回收率（n=9）分别为100.8%,99.3%,100.2%,RSD分别为1.3%,1.2%,1.8%,3批中琥珀酸、橙皮苷、甘草苷含量范围分别为0.072 2~0.079 4、0.029 9~0.034 8,0.022 8~0.029 0 mg·mL^-1。结论 该方法操作简单,缩短了分析时间,重复性好,可为半夏糖浆质量控制提供参考。     

炮制对甘草中主要苷类成分质量分数及其煎出量的影响

目的 单因素考察不同炮制方法对甘草中芹糖甘草苷(LQA)、甘草苷(LQN)、甘草芹葡苷(LCD,异甘草素-葡萄糖芹糖苷)、异甘草苷(ILN)和甘草酸(GL)的质量分数、煎出量及煎出率的影响.方法 采用已建立的HPLC法,同时测定甘草中LQA、LQN、LCD、ILN和GL在不同炮制条件下(不加或加入25%炼蜜,加热60 min,加热温度为90、110、130、150℃;加入25%炼蜜,加热温度为130℃,加热30、60、90、120min)的质量分数、煎出量,计算煎出率.结果 随加热强度(温度及时间)的增大,清烘制得的制甘草中LQA、LQN和GL的质量分数、煎出量显著降低,ILN的质量分数、煎出量显著增加,但其煎出率显著降低.加入炼蜜使以上成分的质量分数、煎出量的变化幅度增强;并在不同程度上影响LQA、LQN、GL的煎出率.结论 加热与加蜜对甘草中主要苷类成分的煎出率均有不同程度的影响.     

HPLC同时测定参柏颗粒中甘草苷、柚皮苷、盐酸小檗碱

目的建立参柏颗粒中甘草苷、柚皮苷和盐酸小檗碱的HPLC测定方法。方法色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长276 nm,柱温30℃。结果甘草苷、柚皮苷、盐酸小檗碱的线性范围分别为0.164～0.820、0.480～2.400、0.048～0.240μg,平均回收率分别为98.6%、98.4%、98.0%。结论该方法简便快速、准确灵敏,为评价和控制参柏颗粒的质量提供了可靠的方法。     

RP-HPLC同时测定温胆汤中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷和甘草酸

目的:建立HPLC同时测定温胆汤中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷和甘草酸含量的方法.方法:DIKMA Diamonsil(2)-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B),线性梯度洗脱;检测波长237,283 nm;柱温25℃;流速1.0 mL·min-1;进样量10μL.结果:甘草苷、柚皮苷、橙皮苷和甘草酸铵的进样量与峰面积,分别在0.019 9～0.119(r=0.999 7),0.180～1.08(r=0.999 7),0.146～0.873(r=0.999 8),0.0393～0.236μg(r=0.999 7)呈良好的线性关系;平均加样同收率依次为97.7%,97.7%,97.1%,98.5%,RSD 1.4%,2.0%,2.0%,1.9%.结论:该方法快速,简便,重复性好,适合于同时测定温胆汤样品中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷和甘草酸的含量.